Beschreibung
78-1002650-001 Hygiene testen > Checklite
Das CheckLite HS Set ist ein Kit zur Analyse der mikrobiellen Biomasse basierend auf der ATP-Messmethode. Es enthält thermostabiles Firefly-Luciferase und ATP-abbaubende Enzyme, die von Kikkoman Corp. entwickelt wurden. Das Biolumineszenz-Reagenz enthält Firefly-Luciferin und Luciferase. Luciferase reagiert spezifisch mit ATP und katalysiert die Reaktion zur Erzeugung von Biolumineszenz. Diese Biolumineszenz ist direkt proportional zur Menge an ATP in der Probe.
Alle lebenden Zellen besitzen ATP als Energiequelle. Daher kann die gesamte Zellmasse bestimmt werden, indem die Biolumineszenz mittels der Luciferase-Reaktion gemessen wird, nachdem das ATP aus den Zellen mit dem ATP-freisetzenden Reagenz in diesem Kit extrahiert wurde.
1 x 100 Analysen
Testdauer: 60-90 Minuten (einschließlich Kalibrierkurve)
Lagerung: 2-8 °C, NICHT GEFRIEREN
Kit-Zusammensetzung:
Luciferin-Luciferase-Reagenz HS: (2 Flaschen, dunkelgrün markiert)
Rekonstitutionspuffer
ATP-freisetzendes Reagenz
ATP-eliminierendes Reagenz
Rekonstitutionspuffer für das ATP-eliminierende Reagenz; (5,5 ml x 2 Ampullen, gelb markiert)
Die ATP-Konzentration in lebenden Zellen verändert sich schnell. Extrahieren Sie daher das ATP aus den Zellen oder frieren Sie die Zellen unmittelbar nach der Probenahme ein. Auch bei der Extraktion kann es erforderlich sein, ATP-abbaubende Enzyme zu hemmen oder zu zerstören, um zu verhindern, dass die Enzyme die ATP-Konzentration senken.
Bereiten Sie das Biolumineszenz- und das ATP-Eliminierungsreagenz gemäß der Anleitung vor. Nach der Probenvorbereitung werden Reagenz und Proben gemischt, um die Reaktion zu starten.
Durch Messung der Biolumineszenz in einem Luminometer, wie dem empfohlenen C-110, kann der ATP-Gehalt bestimmt werden. Diese Ergebnisse können quantifiziert werden, indem sie gegen eine vorbereitete Standardkurve aufgetragen werden. Die Anzahl der mikrobiellen Zellen (koloniebildende Einheiten, KBE) kann auf Basis der Korrelation zwischen der ATP-Menge und der Anzahl der KBE ermittelt werden, die zuvor nach der traditionellen Koloniezählungsmethode gezählt wurden.
Weitere Informationen finden Sie in der Anleitung.

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