Compact Dry LM – Listeria monocytogenes – 500 kpl testilevyä/pakkaus 38210000, Japan

Compact Dry LM on valmis, kromogeeninen levy Listeria monocytogenes -bakteerien laskemista ja tunnistamista varten. Compact Dry -levyn kasvatusalustan ominainen väri erottaa Listeria monocytogenes -bakteerien kolonit muiden Listeria-lajien kolonien. Nämä ovat Listeria-suvun patogeenisia mikro-organismeja. Ne muodostavat erityisen riskin henkilöille, joiden immuunijärjestelmä on heikentynyt. Listeria monocytogenes voi selviytyä matalissa jäädytystiloissa.

Inkubaatioaika ja -lämpötila: 30 ± 1 ℃, 25 ± 1 tuntia
Säilyvyys: 18 kuukautta valmistuspäivästä
Säilytys: Huoneenlämmössä (1 – 30 °C)

Näytteen valmistelu

Tunnistus kiinteissä elintarvikkeissa, vedessä tai nestemäisissä elintarvikkeissa
Lisää näytteeseen 9-kertainen tilavuus puolikas-Fraser-lienttiä ja homogenisoi homogenisaattorilla. Inkuboi 30 + 1 °C:ssa 25 + 1 tuntia rikastusviljelyksiä varten.

Tunnistus kuivatusnäytteessä
Lisää kuivatusliuokseen 9-kertainen tilavuus puolikas-Fraser-lienttiä. Inkuboi 30 + 1 °C:ssa 25 + 1 tuntia rikastusviljelyksiä varten.

Ohjeet
Ava alumiinipussi ja ota ulos 4 levyn setti.
Irrota tarvittava määrä neljän levyn setistä taivuttamalla sitä ylös ja alas samalla kun painat kansiota.
Poista levyn kansi ja tiputa 1 ml sterilointiajainnestettä (esim. suolaliuosta) kuivan arkkiin keskelle muuttaaksesi koko arkki geeliksi.
Tiputa 0,1 ml rikastusviljelyä arkkiin keskelle. Levitä inokulaatti arkissa ylhäältä alas pehmeästi silmukalla ja levitä se koko arkille saadaksesi yksittäisiä kolonioita.
Käännä kannettu levy kääntämällä se takaisin paikoilleen ja inkuboi sitten 24 + 2 tuntia 37 + 1 °C:ssa. Jos L. monocytogenes -bakteerien oletettavat koloniot ovat havaittavissa, inkubaatio voidaan lopettaa tässä vaiheessa. Jos niitä ei ole havaittavissa, inkuboi 24 + 2 tuntia lisää 37 + 1 °C:ssa.

II. Laskemisen käyttöohjeet

Näytteen valmistelu

Elävien bakteerien määrä kiinteissä elintarvikkeissa
Lisää näytteeseen 9-kertainen tilavuus puskuripptonivettä ja homogenisoi homogenisaattorilla. Pipetoi 1 ml homogenisoitua näytettä (tarvittaessa laimennettavaa) kuivan Compact Dry LM -arkkiin keskelle.

Elävien bakteerien määrä vedessä tai nestemäisissä elintarvikkeissa
Pipetoi 1 ml nestenäytettä (tarvittaessa laimennettavaa) kuivan Compact Dry LM -arkkiin keskelle.

Elävien bakteerien määrä kuivatusnäytteessä
Inokuloi 1 ml kuivatusliuosta (joka on laimennettava tarvittaessa) kuivan Compact Dry LM -levyn keskelle. Suositellaan Compact Dry -puikon käyttöä

Ohjeet

1. Avaa alumiinipussi ja ota esiin 4 levyn setti.

2. Irrota tarvittava määrä neljän levyn setistä taivuttamalla ylös ja alas samalla kun painat kansiota. Käytä neljän levyn settiä, kun sarja laimennettuja näytteitä inokuloidaan.

3. Poista levyn kansi ja tiputa 1 ml näytettä kuivan levyn keskelle. Näyte diffundoituu automaattisesti ja tasaisesti koko levylle (keskimääräinen koko 20 cm2) muuttaen sen geeliksi.

4. Käännä kannettu levy ylösalaisin kannen kiinnittämisen jälkeen ja inkuboi 24 + 2 tuntia 37 + 1 °C:ssa. Jos L. monocytogenes -presumptiiviset kolonit ovat havaittavissa, inkubaatio voidaan lopettaa tässä vaiheessa. Jos niitä ei ole havaittavissa, inkuboi lisäaikaa 24 + 2 tuntia 37 + 1 °C:ssa

III. Varotoimet käytössä:

Varotoimet havaitsemisessa ja laskemisessa

1. Inokulaation aikana älä kosketa mediumin pintaa ja/tai tiputuspäätä, ja varo saastumista putoavilta mikrobeilta.

2. Inkubaation aikana pidä kansi tiukasti Compact Dry -levyä vasten välttääksesi kuivumista.

3. Suositellaan stomacher-pussin käyttöä suodattimella poistaaksesi riskin, että ruoan pienet palat siirtyvät mediumin pinnalle.

Varotoimet havaitsemisessa

1. Viivojen vetämisessä älä käytä voimaa silmukkaan, vaan liukaise se kevyesti levyn pinnalla. Suuren halkaisijan ja sileän pinnan omaava silmukka sopii viivojen vetämiseen.
Varotoimet laskemisessa
2. Näyte on laimennettava puskuriliuoksella alle 300 cfu/levyn pitoisuustasoon.

3. Jos levylle inokuloidaan yli 10–4 cfu bakteereja, ei muodostu itsenäisiä kolonioita, ja koko medium värjäytyy.

4. Jos näytteen luonne vaikuttaa tulokseen, näyte on inokuloidava vasta sen jälkeen, kun syy on poistettu esimerkiksi laimentuksen avulla. Esimerkiksi: korkean viskositeetin, syvästi värjäytyneet tai liian korkean tai liian matalan pH:n omaavat näytteet.

IV. Tulkinta havaitsemisessa

1. Tulkkaa punaiset kolonit, joissa on tai ei ole sinisiä reunuksia, Listeria monocytogenes -presumptiivisesti positiivisiksi.

2. Jos L. monocytogenes -määrä on liian suuri, ei muodostu yksittäisiä kolonioita, ja koko levy tai levyn viivattu osa näyttää punaiselta. Tulkkaa tulos presumptiivisesti positiiviseksi myös tässä tapauksessa.

V. Tulkinta laskennassa

1. Laske punaiset kolonit, joilla on tai ei ole sinistä kehystä, L. monocytogenes -presumptiivisiksi.
Tulkinta havaitsemisessa ja laskennassa

2. Jos L. monocytogenes -presumptiivisia koloneja havaitaan, suorita vahvistustestit ISO 11290-1:2017-, ISO 11290-2:2017-standardeiden tai muiden menetelmien mukaisesti.
Liittyvät tuotteet